ഉയർന്ന പ്രകടനമുള്ള ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി (HPLC) വഴി പഴങ്ങളിലും പച്ചക്കറികളിലും ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ അളവ് നിർണ്ണയിക്കൽ.
1. പരീക്ഷണ തത്വവും രീതി രൂപകൽപ്പനയും
പഴങ്ങളിലും പച്ചക്കറികളിലും കാണപ്പെടുന്ന ഒരു സാധാരണ ജൈവ ആസിഡായതിനാൽ, ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ അളവ് ഭക്ഷണത്തിന്റെ രുചിയെയും പോഷകമൂല്യത്തെയും നേരിട്ട് ബാധിക്കുന്നു. ഈ പരീക്ഷണത്തിൽ റിവേഴ്സ്ഡ്-ഫേസ് ഹൈ-പെർഫോമൻസ് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി (RP-HPLC) ഉപയോഗിക്കുന്നു. അസിഡിക് മൊബൈൽ ഫേസ് സാഹചര്യങ്ങളിൽ, C18 ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് കോളം ഉപയോഗിച്ച് ഇടപെടുന്ന വസ്തുക്കളിൽ നിന്ന് ഓക്സാലിക് ആസിഡിനെ അടിസ്ഥാനപരമായി വേർതിരിക്കുന്നു. ഓക്സാലിക് ആസിഡ് തന്മാത്രകളിലെ കാർബോക്സിൽ ഗ്രൂപ്പുകളുടെ UV ആഗിരണം സ്വഭാവസവിശേഷതകളെ അടിസ്ഥാനമാക്കി, 210 nm-ൽ സജ്ജമാക്കിയിരിക്കുന്ന ഒരു അൾട്രാവയലറ്റ് ഡിറ്റക്ടർ ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് വിശകലനത്തിനായി ഉപയോഗിക്കുന്നു.
2. സ്റ്റാൻഡേർഡ് കർവും സാമ്പിൾ തയ്യാറാക്കലും
സ്റ്റാൻഡേർഡ് ലായനികൾ തയ്യാറാക്കാൻ ഒരു ഗ്രേഡിയന്റ് ഡില്യൂഷൻ രീതി ഉപയോഗിക്കുന്നു: 25.0 മില്ലിഗ്രാം ഓക്സാലിക് ആസിഡ് ഡൈഹൈഡ്രേറ്റ് കൃത്യമായി തൂക്കി 25 മില്ലിയിൽ അൾട്രാപ്യുവർ വെള്ളത്തിൽ ലയിപ്പിച്ച് 1 മില്ലിഗ്രാം/മില്ലി സ്റ്റോക്ക് ലായനി ലഭിക്കും. ഇത് 50, 100, 200, 400, 800 µg/മില്ലി എന്നിവയിൽ സ്റ്റാൻഡേർഡ് ലായനികളുടെ ഒരു ശ്രേണിയിലേക്ക് തുടർച്ചയായി ലയിപ്പിക്കുന്നു, ഓരോ സാന്ദ്രതയും ട്രിപ്പിളായി കുത്തിവയ്ക്കുന്നു.
സാമ്പിൾ തയ്യാറാക്കലിനായി, മൈക്രോവേവ് സഹായത്തോടെയുള്ള എക്സ്ട്രാക്ഷൻ ഉപയോഗിക്കുന്നു: 5.00 ഗ്രാം പഴം/പച്ചക്കറി ഹോമോജെനേറ്റ് തൂക്കി, 10 മില്ലി 0.1 മോൾ/ലിറ്റർ ഹൈഡ്രോക്ലോറിക് ആസിഡ് ലായനി ചേർക്കുക, 60°C-ൽ മൈക്രോവേവിൽ 10 മിനിറ്റ് നേരം പുരട്ടുക, 0.45 µm മെംബ്രൻ ഫിൽട്ടറിലൂടെ ഫിൽട്ടർ ചെയ്യുക, പരിശോധനയ്ക്കായി ഫിൽട്രേറ്റ് ശേഖരിക്കുക.
3. ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് അവസ്ഥകളുടെ ഒപ്റ്റിമൈസേഷൻ
മൊബൈൽ ഘട്ടം 0.01 mol/L പൊട്ടാസ്യം ഡൈഹൈഡ്രജൻ ഫോസ്ഫേറ്റ് ബഫർ (pH 2.5)–അസെറ്റോണിട്രൈൽ (95:5) സിസ്റ്റമാണ്, 0.8 mL/min എന്ന ഫ്ലോ റേറ്റ്, 35°C എന്ന കോളം താപനില എന്നിവ ഇതിൽ ഉൾപ്പെടുന്നു. അസെറ്റോണിട്രൈൽ അനുപാതം ക്രമീകരിക്കുമ്പോൾ, ഓർഗാനിക് ഘട്ടം 10% കവിയുമ്പോൾ, ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ നിലനിർത്തൽ സമയം 3 മിനിറ്റിൽ താഴെയായി കുറയുന്നു, പക്ഷേ പീക്ക് ടെയിലിംഗ് സംഭവിക്കുന്നു. അന്തിമ ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്ത സാഹചര്യങ്ങളിൽ, ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ നിലനിർത്തൽ സമയം 4.2 മിനിറ്റാണ്, ഇത് അടുത്തുള്ള സിട്രിക് ആസിഡിൽ നിന്നും മാലിക് ആസിഡിൽ നിന്നും പൂർണ്ണമായി വേർതിരിക്കുന്നു (റെസല്യൂഷൻ > 1.5).
4. രീതി മൂല്യനിർണ്ണയം
ലീനിയർ ശ്രേണി പരിശോധനയിൽ പീക്ക് ഏരിയയും സാന്ദ്രതയും തമ്മിൽ 10–1000 µg/mL (R² = 0.9993) പരിധിയിൽ നല്ല രേഖീയ ബന്ധം കാണിക്കുന്നു. സിഗ്നൽ-ടു-നോയ്സ് അനുപാത രീതി നിർണ്ണയിക്കുന്ന കണ്ടെത്തലിന്റെ പരിധി (LOD) 0.5 µg/mL ആണ്. ആവർത്തനക്ഷമതാ പരിശോധനകളിൽ, ഒരേ ചീര സാമ്പിളിന്റെ ആറ് റെപ്ലിക്കേറ്റ് ഡിറ്റർമിനേഷനുകൾക്കുള്ള RSD 1.8% ആണ്. മൂന്ന് തലങ്ങളിൽ (80%, 100%, 120%) സ്പൈക്ക് റിക്കവറി പരീക്ഷണങ്ങൾ യഥാക്രമം 98.2%, 102.4%, 97.8% എന്നിങ്ങനെ ശരാശരി റിക്കവറി ഫലങ്ങൾ നൽകുന്നു, ഇത് അളവ് വിശകലനത്തിനുള്ള ആവശ്യകതകൾ നിറവേറ്റുന്നു.
5. യഥാർത്ഥ സാമ്പിളുകളുടെ വിശകലനം
വാണിജ്യപരമായി ലഭ്യമായ ആറ് പഴങ്ങളും പച്ചക്കറികളും പരിശോധിച്ചു: ചീര (356 ± 12 mg/100 ഗ്രാം), സെലറി (215 ± 9 mg/100 ഗ്രാം), തക്കാളി (18 ± 2 mg/100 ഗ്രാം), ആപ്പിൾ (6 ± 1 mg/100 ഗ്രാം), വാഴപ്പഴം (കണ്ടെത്തിയില്ല), ബ്രോക്കോളി (89 ± 5 mg/100 ഗ്രാം). ദേശീയ സ്റ്റാൻഡേർഡ് രീതിയുമായി (GB 5009.277-2016) താരതമ്യം ചെയ്യുമ്പോൾ രണ്ട് രീതികൾ തമ്മിലുള്ള ആപേക്ഷിക വ്യതിയാനം 5% ൽ താഴെയാണെന്ന് കാണിക്കുന്നു, ഇത് ഈ രീതിയുടെ വിശ്വാസ്യത പരിശോധിക്കുന്നു. പ്രത്യേകിച്ചും, കുറഞ്ഞ ഉള്ളടക്കമുള്ള സാമ്പിളുകൾ വിശകലനം ചെയ്യുമ്പോൾ പരമ്പരാഗത ടൈറ്ററേഷൻ രീതികളേക്കാൾ ഉയർന്ന സംവേദനക്ഷമത HPLC രീതി പ്രകടിപ്പിക്കുന്നു.
6. പ്രധാന കുറിപ്പുകൾ
സാമ്പിൾ പ്രീട്രീറ്റ്മെന്റ് സമയത്ത് pH മൂല്യം കർശനമായി നിയന്ത്രിക്കുക. സത്തിൽ pH 3 കവിയുന്നുവെങ്കിൽ, കാൽസ്യം ഓക്സലേറ്റ് അവശിഷ്ടം കുറഞ്ഞ പരിശോധനാ ഫലങ്ങളിലേക്ക് നയിക്കും. ഉപ്പ് അവശിഷ്ടവും കോളം തടസ്സവും ഒഴിവാക്കാൻ മൊബൈൽ ഘട്ടം ദിവസവും പുതുതായി തയ്യാറാക്കണം. ഓരോ 20 കുത്തിവയ്പ്പുകൾക്കും ശേഷം, കോളം കാര്യക്ഷമത കുറയുന്നത് തടയാൻ 30 മിനിറ്റ് നേരത്തേക്ക് അസറ്റോണിട്രൈൽ–വെള്ളം (30:70) ഉപയോഗിച്ച് കോളം ഫ്ലഷ് ചെയ്യുക. പിഗ്മെന്റ് അടങ്ങിയ സാമ്പിളുകൾക്ക് (ഉദാ: പർപ്പിൾ കാബേജ്), കുത്തിവയ്പ്പിന് മുമ്പ് ഒരു സോളിഡ്-ഫേസ് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ ശുദ്ധീകരണ ഘട്ടം ചേർക്കാൻ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.
7. പ്രയോഗത്തിന്റെയും വിപുലീകരണത്തിന്റെയും നിർദ്ദേശങ്ങൾ
മൂത്രം, രക്തം തുടങ്ങിയ ജൈവ സാമ്പിളുകളിൽ ഓക്സാലിക് ആസിഡ് കണ്ടെത്തുന്നതിലേക്ക് ഈ രീതി വ്യാപിപ്പിക്കാൻ കഴിയും. മൊബൈൽ ഫേസ് ഘടന ക്രമീകരിക്കുന്നതിലൂടെ (ഉദാഹരണത്തിന്, ടെട്രാബ്യൂട്ടിലാമോണിയം ഹൈഡ്രോക്സൈഡ് ചേർക്കുന്നത്), ഓക്സാലിക് ആസിഡും അതിന്റെ മെറ്റബോളിറ്റുകളും ഒരേസമയം നിർണ്ണയിക്കാൻ കഴിയും. ഒരു മാസ് സ്പെക്ട്രോമെട്രി ഡിറ്റക്ടറുമായി സംയോജിപ്പിച്ച്, കൂടുതൽ കൃത്യമായ ഒരു ട്രെയ്സ് ഡിറ്റക്ഷൻ രീതി സ്ഥാപിക്കാൻ കഴിയും. ഭക്ഷ്യ സംസ്കരണ വ്യവസായത്തിൽ, കുറഞ്ഞ ഓക്സാലിക് ആസിഡ് ഇനങ്ങൾ തിരഞ്ഞെടുക്കുന്നതിനും പാചക പ്രക്രിയകളുടെ ഒപ്റ്റിമൈസേഷനും ഈ രീതിക്ക് പ്രധാനപ്പെട്ട ഡാറ്റ പിന്തുണ നൽകാൻ കഴിയും.
സിബോ അൻഹാവോ കെമിക്കൽ കമ്പനി ലിമിറ്റഡ് – ഓക്സാലിക് ആസിഡ്
ചൈനയിലെ ഷാൻഡോങ്ങിൽ നിന്നുള്ള ഉയർന്ന നിലവാരമുള്ള ഓക്സാലിക് ആസിഡിന്റെ (ഇൻഡസ്ട്രിയൽ ഗ്രേഡ്, 99.6% മിനിറ്റ്) വിശ്വസനീയമായ വിതരണക്കാരനും കയറ്റുമതിക്കാരനുമാണ് സിബോ അൻഹാവോ കെമിക്കൽ കമ്പനി ലിമിറ്റഡ്. ഞങ്ങളുടെ ഓക്സാലിക് ആസിഡ് C₂H₂O₄ എന്ന തന്മാത്രാ സൂത്രവാക്യമുള്ള, എത്തനേഡിയോയിക് ആസിഡ് എന്നും അറിയപ്പെടുന്ന ഒരു വെളുത്ത ക്രിസ്റ്റലിൻ ഖരവസ്തുവാണ്. തുണിത്തരങ്ങൾ, തുകൽ, ലോഹശാസ്ത്രം, അപൂർവ ഭൂമി സംസ്കരണം, കെമിക്കൽ ക്ലീനിംഗ്, നിർമ്മാണ വ്യവസായങ്ങൾ എന്നിവയുടെ ആവശ്യങ്ങൾ നിറവേറ്റുന്ന ഉയർന്ന പരിശുദ്ധി, കുറഞ്ഞ മാലിന്യങ്ങൾ, ബാച്ചുകളിലുടനീളം സ്ഥിരതയുള്ള ഗുണനിലവാരം എന്നിവ ഇതിൽ ഉൾപ്പെടുന്നു.
25 കിലോഗ്രാം ബാഗുകളിലും, 50 കിലോഗ്രാം ബാഗുകളിലും, 1000 കിലോഗ്രാം ബൾക്ക് ബാഗുകളിലും ലഭ്യമായ അൺഹൈഡ്രസ്, ഡൈഹൈഡ്രേറ്റ് ഓക്സാലിക് ആസിഡ് ഞങ്ങൾ വിതരണം ചെയ്യുന്നു. കർശനമായ ക്യുസി നടപടിക്രമങ്ങൾ, പൂർണ്ണമായ പരിശോധനാ റിപ്പോർട്ടുകൾ, വഴക്കമുള്ള വിതരണ പദ്ധതികൾ എന്നിവയിലൂടെ, ആഗോള വാങ്ങുന്നവർക്ക് സ്ഥിരതയുള്ള ഡെലിവറിയും സ്ഥിരമായ പ്രകടനവും ഞങ്ങൾ ഉറപ്പാക്കുന്നു. വിശ്വസനീയമായ ഗുണനിലവാരത്തിനും മത്സരാധിഷ്ഠിത വിലനിർണ്ണയത്തിനും അംഗീകാരം നേടിക്കൊണ്ട്, തെക്കുകിഴക്കൻ ഏഷ്യ, യൂറോപ്പ്, ആഫ്രിക്ക, അമേരിക്ക എന്നിവിടങ്ങളിലേക്ക് ഞങ്ങളുടെ ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ വ്യാപകമായി കയറ്റുമതി ചെയ്യപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്.
വിശ്വസനീയമായ ഓക്സാലിക് ആസിഡ് വിതരണത്തിനും പ്രൊഫഷണൽ വൺ-സ്റ്റോപ്പ് കെമിക്കൽ സേവനത്തിനും സിബോ അൻഹാവോ കെമിക്കൽ തിരഞ്ഞെടുക്കുക.
നിങ്ങളുടെ ബിസിനസ്സിന് സ്ഥിരമായ പ്രകടനവും മൂല്യവും നൽകുന്ന ഉയർന്ന ശുദ്ധതയുള്ള ഓക്സാലിക് ആസിഡിനായി സിബോ അൻഹാവോ കെമിക്കൽ തിരഞ്ഞെടുക്കുക. ബൾക്ക് ഓർഡറുകൾക്കോ സാങ്കേതിക സവിശേഷതകൾക്കോ ഞങ്ങളെ ബന്ധപ്പെടുക: info@anhaochemical.com
